島津LC-10AD型高效液相色譜儀操作規(guī)程
1．目的
規(guī)范島津LC-10AD型高效液相色譜儀的使用。
2．范圍
適用于島津LC-10AD型高效液相色譜儀的使用。
3．職責(zé)
質(zhì)檢員對本規(guī)程的實(shí)施負(fù)責(zé)。
4．規(guī)程
4.1 系統(tǒng)組成
本系統(tǒng)由1個LC-10ADvp溶劑輸送泵、FCV-10AL低壓梯度混合器、在線脫氣機(jī)、Rheodyne 7725i手動進(jìn)樣閥、SPD-10Avp紫外-可見檢測器、N2000色譜數(shù)據(jù)工作站和電腦等組成，另外還包括打印機(jī)、不間斷電源等輔助設(shè)備。
4.2 準(zhǔn)備
4.2.1 準(zhǔn)備所需的流動相，用合適的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20min。
4.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱（注意方向）和定量環(huán)。
4.2.3 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液（也可在平衡系統(tǒng)時配制），用合適的0.45μm濾膜過濾。
4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。
4.3 開機(jī)
接通電源，依次打開FCV-10AL低壓梯度混合器、脫氣機(jī)、LC-10ADVP輸液泵、AT-130柱溫箱，SPD-10Avp紫外檢測器，待檢測器自檢結(jié)束顯示測量狀態(tài)時，打開打印機(jī)、電腦顯示器、主機(jī)，最后打開色譜工作站。
4.4 參數(shù)設(shè)定
4.4.1 波長設(shè)定：在檢測器顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數(shù)字鍵輸入所需波長值，按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出到初始屏幕。
4.4.2 流速設(shè)定：在輸送泵顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數(shù)字鍵輸入所需的流速（柱在線時流速一般不超過1ml/min），按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出。
4.4.3 流動相比例設(shè)定：在輸送泵顯示初始屏幕時，按[conc]鍵，用數(shù)字鍵輸入流動相B的濃度百分?jǐn)?shù)，用數(shù)字鍵輸入流動相C的濃度百分?jǐn)?shù)，用數(shù)字鍵輸入流動相D的濃度百分?jǐn)?shù)，按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出。
4.5 更換流動相并排氣泡
4.5.1將管路的吸濾器放入裝有準(zhǔn)備好的流動相的儲液瓶中；
4.5.2 逆時針轉(zhuǎn)動泵的排液閥180°，打開排液閥；
4.5.3 按輸送泵的[purge]鍵，pump指示燈亮，泵大約以5.0ml/min的流速沖洗，3min后停止；
4.5.4 將排液閥順時針旋轉(zhuǎn)到底，關(guān)閉排液閥。
4.5.5 如管路中仍有氣泡，則重復(fù)以上操作直至氣泡排盡。
4.5.6 如按以上方法不能排盡氣泡，從柱入口處拆下連接管，放入廢液瓶中，設(shè)流速為5ml/min，按[pump]鍵，沖洗3min后再按[pump]鍵停泵，重新接上柱并將流速重設(shè)為規(guī)定值
4.6 平衡系統(tǒng)
4.6.1 按《N2000色譜數(shù)據(jù)工作站操作規(guī)程》打開“在線色譜工作站”軟件，輸入實(shí)驗(yàn)信息并設(shè)定各項方法參數(shù)后，按下“數(shù)據(jù)收集”頁的[查看基線] 按鈕。
4.6.2洗脫方式
4.6.2.1 按泵的[pump]鍵， pump指示燈亮。用檢驗(yàn)方法規(guī)定的流動相沖洗系統(tǒng)，一般最少需6倍柱體積的流動相。
4.6.2.2 檢查各管路連接處是否漏液，如漏液應(yīng)予以排除。
4.6.2.3 觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動應(yīng)不超過1MPa。如超過則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡，按4.5.6操作。
4.6.2.4 觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min，噪聲為<0.001mV時，可認(rèn)為系統(tǒng)已達(dá)到平衡狀態(tài)，可以進(jìn)樣。
4.7 進(jìn)樣
4.7.1 進(jìn)樣前按檢測器[zero]鍵調(diào)零，按軟件中 [零點(diǎn)校正] 按鈕校正基線零點(diǎn)，再按一下 [查看基線] 按鈕使其彈起。
4.7.2 用試樣溶液清洗注射器，并排除氣泡后抽取適量。