高效液相色譜柱的選擇

一、硅膠基質(zhì)填料  
1、正相色譜

正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica）以及其他具有極性官能團(tuán)胺基團(tuán)，如（NH2，APS）和氰基團(tuán)（CN，CPS）的鍵合相填料。  由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其他極性基團(tuán)極性較強(qiáng)，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小，即極性較弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。 

2、反向色譜

反向色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì)，表面鍵合有極性相對(duì)較弱官能團(tuán)的鍵合相。反向色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng)，通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組分最先被沖洗出，而極性弱的組分會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。 

      常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。

 二、聚合物填料

      聚合物填料多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等，其重要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1—14均可使用。相對(duì)于硅膠基質(zhì)的C18填料，這類(lèi)填料具有更強(qiáng)的疏水性；大孔的聚合物對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。現(xiàn)有的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料，色譜柱柱效較低。  三、其它無(wú)機(jī)填料 其它HPLC的無(wú)機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化由于其特殊的性質(zhì)，一般僅限于特殊的用途。如，石墨化碳黑正逐漸成為反向色譜柱填料。這種填料的分離不同于硅膠基質(zhì)烷基鍵合相，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ)，不再需其它的表面改性。該柱填料一般比烷基鍵合相硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng)。石墨化碳可用于分離某些幾何異構(gòu)體，由于在HPLC流動(dòng)相中不會(huì)被溶解，這類(lèi)柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可以用于HPLC。氧化鋁微粒剛性強(qiáng)，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床，其優(yōu)點(diǎn)是可以在PH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用。但由于氧化鋁與堿性化合物的作用也很強(qiáng)，應(yīng)用范圍受到一定限制，所以未能廣泛應(yīng)用。新型色譜氧化鋯基質(zhì)填料也可用于HPLC。商品化的只有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應(yīng)用PH1-14，溫度可達(dá)100℃。由于氧化鋯填料是最近幾年才開(kāi)始研究，加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度，其重要用途與優(yōu)勢(shì)尚在進(jìn)行之中。

智能陶瓷纖維馬弗爐在煤炭灰分測(cè)定中有哪些優(yōu)勢(shì)？ (11/15)

固相萃取儀在生物樣本處理中的應(yīng)用 (10/25)

智能陶瓷纖維馬弗爐適用于哪些材料科學(xué)研究 (10/25)

容量法卡爾費(fèi)休水份測(cè)定儀的原理 (07/17)

索氏提取器采用什么原理進(jìn)行萃取的 (07/15)

全自動(dòng)視頻熔點(diǎn)儀：技術(shù)原理與應(yīng)用實(shí)踐 (07/12)

選擇無(wú)菌拍打式均質(zhì)器時(shí)需要考慮這些關(guān)鍵因素 (07/11)

智能陶瓷纖維馬弗爐在粉末冶金方面的應(yīng)用 (07/11)

陶瓷纖維馬弗爐在金屬熔煉領(lǐng)域的應(yīng)用 (05/23)

SPE固相萃取儀在藥學(xué)研究中的應(yīng)用 (05/10)