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  • 蔬菜殘留物檢驗(yàn)方法

    發(fā)布于 2016/06/22閱讀(1480)來(lái)源 ltrlw

    摘要

    據(jù)最新的研究表明農(nóng)藥污染較重的有葉類蔬菜,其中韭菜、油菜受到的污染比例最大。茄果類蔬菜如青椒、番茄等,嫩莢類蔬菜如豆角等,鱗莖類蔬菜如蔥、蒜、洋蔥等,農(nóng)藥的污染相對(duì)較小。

    內(nèi)容

                   蔬菜殘留物檢驗(yàn)方法

    一、對(duì)蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)

    據(jù)最新的研究表明農(nóng)藥污染較重的有葉類蔬菜,其中韭菜、油菜受

    到的污染比例最大。茄果類蔬菜如青椒、番茄等,嫩莢類蔬菜如豆角等,

    鱗莖類蔬菜如蔥、蒜、洋蔥等,農(nóng)藥的污染相對(duì)較小。

    農(nóng)藥對(duì)人體的危害主要體現(xiàn)在以下兩方面:能使神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、排泄系統(tǒng)致癌;通過(guò)生物鏈對(duì)生態(tài)系統(tǒng)造成破壞。

    其主要通過(guò)以下幾種途徑對(duì)食物進(jìn)行污染:農(nóng)藥直接污染農(nóng)作物;因水質(zhì)污染進(jìn)而污染水產(chǎn)品;土壤中沉積的農(nóng)藥通過(guò)農(nóng)作物的根系吸收到作物組織內(nèi)部而造成污染;大氣中漂浮的農(nóng)藥隨風(fēng)向、雨水對(duì)地面作物、水生生物產(chǎn)生影響;飼料中殘留的農(nóng)藥轉(zhuǎn)入禽畜體內(nèi),造成此類食品的污染。

    目前所使用的農(nóng)藥按其化學(xué)結(jié)構(gòu)大致可分為以下幾類:

    有機(jī)氯類;有機(jī)磷類;氨基甲酸酯類;擬除蟲菊酯類等。

    根據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥Ops)的化學(xué)特性和毒理學(xué)性質(zhì),檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥Ops)的方法有二大類:

    速測(cè)儀法 ;儀器分析法(氣相-質(zhì)譜聯(lián)用法)

    (一)、速測(cè)儀法

    速測(cè)儀的檢測(cè)方法有兩種:
    (GB/T5009.199-2003)

    速測(cè)卡法(紙片法)

    酶抑制率法(分光光度法)

    1.速測(cè)卡法(紙片法)

    檢測(cè)原理

    有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶的活性具有抑制作用,通過(guò)測(cè)定乙酰膽堿酯酶的活性被抑制的程度,根據(jù)樣品與乙酰膽堿酯酶作用后的顯色反應(yīng),即可知樣品中含有的農(nóng)藥殘留情況。

    1.1試劑

    1.1.1  固化有膽堿酯酶和靛酚乙酸酯試劑的紙片(速測(cè)卡)

    1.1.2  pH7.5緩沖溶液:分別取15.0g磷酸氫二鈉(Na2HP04·12H2O)1.59g無(wú)水磷酸二氫鉀[KH2P04],用500mL蒸餾水溶解。

    1.2儀器

    1.2.1常量天平  有條件時(shí)配備37±2恒溫裝置

    1.3分析步驟

    1.3.1整體測(cè)定法

    1.3.1.1選取有代表性的蔬菜樣品,擦去表面泥土,剪成1cm左右見方碎片,取5g放入帶蓋瓶中,加入10mL緩沖溶液,震搖50次,靜置2min以上。

    1.3.1.2取一片速測(cè)卡,用白色藥片沾取提取液,放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng),有條件時(shí)在37恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤(rùn)。

    1.3.1.3將速測(cè)卡對(duì)折,用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)。

    1.3.1.4每批測(cè)定應(yīng)設(shè)一個(gè)緩沖液的空白對(duì)照卡。

    1.3.2表面測(cè)定法(粗篩法)

    1.3.2.1擦去蔬菜表面泥土,滴23滴緩沖溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。

    1.3.2.2取一片速測(cè)卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。

    1.3.2.3放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng),有條件時(shí)在37 恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤(rùn)。

    1.3.2.4將速測(cè)卡對(duì)折,用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)。

    1.3.2.5每批測(cè)定應(yīng)設(shè)一個(gè)緩沖液的空白對(duì)照卡。

    2.酶抑制率法(分光光度法)

    2.1試劑

    2.1.1  pH8.0緩沖溶液:分別取11.9g無(wú)水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀,用1000ml蒸餾水溶解。

    2.1.2  顯色劑:分別取160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氫鈉,用20ml緩沖溶液溶解,4冰箱中保存。

    2.1.3  底物:取25.0mg硫代乙酰膽堿,加3.0ml蒸餾水溶解,搖勻后置4 冰箱中保存?zhèn)溆谩14嫫诓怀^(guò)兩周。

    2.1.4  乙酰膽堿酯酶:根據(jù)酶的活性情況,用緩沖溶液溶解,3min的吸光度變化△Ao值應(yīng)控制在0.3以上。搖勻后置4冰箱中保存?zhèn)溆?,保存期不超過(guò)四天。

    2.1.5 可選用由以上試劑制備的試劑盒。乙酰膽堿酯酶的△Ao值應(yīng)控制在0.3以上。

    2.2儀器

    2.2.1 分光光度計(jì)或相應(yīng)測(cè)定儀及常量天平。

    2.3分析步驟

    2.3.1 樣品處理:選取有代表性的蔬菜樣品,沖洗掉表面泥土,剪成1cm左右見方碎片,取樣品1g,放入燒杯或提取瓶中,加入5mL緩沖溶液,振蕩12min,倒出提取液,靜置35min,待用。

    2.3.2  對(duì)照溶液測(cè)試:先于試管中加入2.5mL緩沖溶液,再加入0.1mL酶液、0.1mL顯色劑,搖勻后于37放置15min以上(每批樣品的控制時(shí)間應(yīng)一致)。加入0.1mL底物搖勻,此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng),應(yīng)立即放入儀器比色池中,記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值△Ao。

    2.3.3  樣品溶液測(cè)試:先于試管中加入2.5mL樣品提取液,其它操作與對(duì)照溶液測(cè)試相同,記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值△At。

    (二)、儀器分析法(氣相-質(zhì)譜聯(lián)用法)

    蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)步驟

    農(nóng)藥殘留檢測(cè)步驟主要包括采樣、樣品保藏、前處理(粉碎、提取/萃取、凈化、濃縮等)、儀器定性定量分析、檢測(cè)結(jié)果處理及分析等。

    3.1 樣品均質(zhì)

       在檢測(cè)蔬菜的某些指標(biāo)時(shí),由于物料不是均質(zhì)的,各部位的成分及污染的程度不同,必須把樣品破碎混勻成均質(zhì)液,才能進(jìn)行檢測(cè)。如何將蔬菜均質(zhì)?我們可以采用拍擊式均質(zhì)器將蔬菜和稀釋液加入到無(wú)菌的過(guò)濾器樣品袋中,然后將樣品袋放入均質(zhì)器中,關(guān)上門即可以完成均質(zhì),根據(jù)需要,配制所需濃度,采用相應(yīng)的分析儀器進(jìn)行測(cè)定。

    3.2 濃縮凈化

    我們知道農(nóng)藥殘留污染檢測(cè)屬于痕量化學(xué)分析,正確選擇試驗(yàn)儀器可以起到事半功倍的作用。使用固相萃取裝置和液液萃取裝置(加入萃取劑,采用垂直振蕩器就可以,這樣大大減少了勞動(dòng)強(qiáng)度)萃取樣品中的目標(biāo)物質(zhì);使用氮吹儀濃縮樣品中的目標(biāo)物質(zhì)。

    現(xiàn)在常用到是氣相-質(zhì)譜聯(lián)用法

    氣相-質(zhì)譜聯(lián)用法樣品處理過(guò)程 

        將樣品先攪碎  → 加30~100g無(wú)水Na2SO4 脫水→加活性炭10~30g   →加 50mLCH2Cl2 萃取→ 濃縮→ 定容 

    現(xiàn)代社會(huì)人們對(duì)食品安全要求越來(lái)越嚴(yán)格,所以在蔬菜生產(chǎn)管理、農(nóng)藥正確使用上公司應(yīng)嚴(yán)格按照蔬菜生產(chǎn)流程標(biāo)準(zhǔn)操作,檢驗(yàn)部門也要按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。
     
    二、部分蔬菜直觀法檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) 

    蔬菜的詳細(xì)驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)

    序號(hào)

    品名

    優(yōu)質(zhì)質(zhì)量形態(tài)劣質(zhì)質(zhì)    優(yōu)質(zhì)質(zhì)量形態(tài)

    劣質(zhì)質(zhì)量形態(tài)

    1

    小白菜

    梗白色,較嫩較短,葉子淡綠色,整棵菜水份充足,無(wú)根.

    有黃葉,枯萎,蟲蛀洞或小蟲,腐爛,壓傷,散水太多;

    2

    青菜

    梗白色或淺綠色,較嫩,葉子深綠色,整棵菜水份充足,無(wú)根.

    有黃葉,枯萎,蟲蛀洞或小蟲,腐爛,壓傷,散水太多;

    3

    西芹

    葉莖寬厚,顏色深綠,新鮮肥嫩,爽口無(wú)渣。

    有黃葉、梗傷,水秀,腐爛,斷裂,枯萎。

    4

    菠菜

    顏色碧綠,平嫩,葉子大、挺直,根桃紅,無(wú)主莖且無(wú)柄無(wú)紅色,棵株適當(dāng)。

    有泥土,帶穗,抽莖和黃葉,枯葉,干尖,腐爛和蟲眼。

    5

    生菜

    顏色鮮艷,淡綠,葉子水份充足,脆嫩薄、可豎起,棵株挺直。

    葉子發(fā)黃,有褐色邊或褐斑,干軟,卷曲,脫葉。

    6

    芥菜

    葉大而薄、深綠色、柄嫩綠脆,無(wú)主莖,葉株挺直,水份充足。

    黃葉、黃葉邊、有蟲、干軟。

    7

    莧菜

    有紅綠兩種,葉子為綠色或紅色,葉大薄軟,有光澤,莖細(xì)短、光滑嫩脆,棵株挺直,水份充足。

    有黃葉,葉背有白點(diǎn)有蟲,枯萎有籽,莖粗老。

    8

    菜芯

    顏色碧綠、梗脆嫩,掐之易斷,有花蕾或無(wú)花蕾,棵株挺直,水分充足。

    有葉班、蟲洞、枯萎,梗粗老,或開花過(guò)多。

    9

    芥蘭

    顏色墨綠,葉短少,有白霜,挺直,梗皮有光澤、綠色、粗長(zhǎng)、斷面綠白色、濕潤(rùn),

    葉枯萎有花蕾、壓傷,斷面黃色、銹色、腐爛或干澀。

    10

    香菜

    翠綠、挺直、根部無(wú)泥、香氣重、水份充足。

    黃葉、腐爛、泥土、發(fā)蔫。

    11

    青椒

    長(zhǎng)形或蘿卜形,顏色碧綠,有光澤、表面光滑,飽滿有一定硬度和彈性,肉層中等有辣味。

    腐爛、干尖、表面無(wú)光澤、有皺紋、斷裂,干軟、凹陷,有泥土.

    12

    蕃茄

    顏色大紅、粉紅或黃色、光澤亮艷,個(gè)大圓整,飽滿有彈性,至少八成熟,肉厚籽少,味甜中帶酸。

    腐爛、壓傷、過(guò)軟或過(guò)硬,表皮有斑點(diǎn)或畸形果。

    13

    大白菜

    外葉淡綠色、奶黃色、幫白內(nèi)葉乳白色,葉新鮮光澤,棵株大,完整,包心堅(jiān)實(shí)緊密,根部斷面潔白完整。

    空心、亂心、壓傷、凍傷、蟲蛀、雨淋、水浸、裂縫、老幫黃葉、外葉萎蔫,包心松,有泥土。

    14

    茄子

    色正(青、紫、白)形正(棒形、卵形、燈泡形),表面光滑有光澤,有彈性不軟,皮薄肉嫩籽少,個(gè)體均勻。

    表皮有皺,壓傷、蟲蛀、爛斑、籽肉分離,太軟。

    15

    西蘭花

    花蕾顏色深綠、功密緊實(shí)不散,球形完整、表面有白霜,花梗深綠、緊湊,外葉綠色且少,主莖短。

    花蕾有爛斑,污點(diǎn)、粗且松,表面發(fā)干,壓傷、刀傷、主莖長(zhǎng)。

    16

    黃瓜

    顏色青綠,瓜身細(xì)短、條直均勻,瓜把小,頂花帶刺,有白霜或光澤,肉脆甜、瓤小籽少。

    顏色黃,皮皺,有大肚或瘦尖,彎曲,有壓傷、腐爛、斷裂,肉白或有空心。

    17

    冬瓜

    皮青翠,有白霜,肉潔白、厚嫩、緊密,膛小,有一定硬度。

    壓傷、爛斑、較軟,肉有空隙,水份少,發(fā)糠。

    18

    絲瓜

    有棱和無(wú)棱兩種,皮顏色翠綠、薄嫩、有白霜,條直均勻、細(xì)長(zhǎng)挺直,易斷無(wú)彈性,肉潔白軟嫩、子小。

    顏色泛黃、皮粗糙,彎曲、不均,傷疤、爛斑、黃斑,較軟有彈性,肉松軟或空。

    19

    苦瓜

    顏色淡綠色有光澤,凸處明顯,條直均勻,有一定硬度,瓤黃白,子小、味苦。

    腐爛、壓傷、刀傷、磨損,有蟲洞,斑點(diǎn),顏色發(fā)黃、甚至發(fā)紅,瓜身軟。

    20

    四季豆

    顏色翠綠色、表面有細(xì)絨毛,豆莢細(xì)長(zhǎng)均勻,水分充足。飽滿有韌性、能彎曲,指甲掐之后有痕,斷之容易。

    有蟲洞,斑點(diǎn)水銹腐爛萎蔫,纖維明顯,筋絲粗韌,豆莢粗壯,難彎曲。

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